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組培實(shí)驗室的組成重要部分

  組培室建設首要考慮的問(wèn)題就是組培室需要哪些設備條件和需要什么樣的培養條件。對這些有了全面了解以后,我們便可以因地制宜地新建或利用現有房屋建設實(shí)驗室。在設計組培室時(shí),一般情況應按組培的流程來(lái)設計,同時(shí)考慮人物分流順暢,空間合理利用。植物組織培養要求嚴格的無(wú)菌的條件,需要一定專(zhuān)業(yè)儀器設備、器材和用具,同時(shí)還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。

  一個(gè)標準的組織培養實(shí)驗室應當包括洗滌室、配置室、接種室、培養室、觀(guān)察室(冷卻室)、滅菌室、洗苗室等。在實(shí)際中可結合可行條件,合并一部分。

 。ㄒ唬┫礈焓

  洗滌室完成玻璃器皿和其它儀器的清洗、干燥和貯存。室內應配備大型水槽,用于培養器皿的洗滌,好是內襯白瓷磚的水泥槽。為防止碰壞玻璃器皿,可鋪橡膠板,上下水道要暢通。備有大型塑料筐,用于放置培養器皿?芍苯又糜跀R架上,以節約空間和便于運輸工作。備有空干架,以空干涮凈的培養器皿。

 。ǘ┡渲檬、滅菌室(可分開(kāi))

  準備室要求明亮、通風(fēng)。在準備室內要完成培養基制備以及試管苗出瓶、清洗與整理工作。如果房間較多,可將準備室分為洗滌室和配置室兩部分。洗滌室專(zhuān)門(mén)負責試管苗出瓶與培養器皿的清洗工作;配置室則負責培養基的配制、分裝、包扎和高壓滅菌等工作。

  為完成培養基的制備工作,準備室還應配備以下儀器設備:

  1.工作臺

  其高度應方便配制工作。

  2.藥品柜

  用以放置常用藥品。

  3.普通冰箱

  主要用于貯存母液、各種易變質(zhì)、易分解的化學(xué)藥品以及植物材料等。

  4.電子分析天平和托盤(pán)天平

  電子分析天平精確度為0.001g,用于稱(chēng)取大量元素、微量元素、維生素、激素等微量藥品;托盤(pán)天平精確度為0.1g,用于稱(chēng)取用量較大的糖和瓊脂等。天平應放置在干燥、不受振動(dòng)的固定操作臺上。

  5.純水儀或電蒸餾水器

  純水儀提供純水,水質(zhì)好。電蒸餾水器, 采用硬質(zhì)玻璃或金屬制成。蒸餾水用于配制母液或培養基,配培養基可用自來(lái)水來(lái)代替,若實(shí)驗要求嚴格的話(huà),則須用蒸餾水。

  6.磁力攪拌器

  磁力攪拌器用于加速攪拌難溶的物質(zhì),如各種化學(xué)物質(zhì)、瓊脂粉等 。磁力攪拌器還可加熱,使之更利于溶解。

  7.恒溫水浴鍋或恒溫振蕩水浴

  水浴鍋用于難溶藥品的溶解、瓊脂的溶化等。若沒(méi)有水浴鍋,也可用1500或2000W電爐或電飯鍋代替。電爐應配有鋁鍋。

  8.酸度計

  組織培養中培養基pH值的準確度是十分重要的,應當使用酸度計,若無(wú)酸度計,也可使用pH試紙進(jìn)行粗測。首次使用酸度計前,應用標準液調節定位,然后固定。測量pH時(shí),待測液必須充分攪拌均勻。如果培養基溫度過(guò)高,測量時(shí)要調整pH計上的溫度扭使之和培養基溫度相當。注意保護好玻璃電極,用后電極應用蒸餾水沖洗凈,蓋上電極帽。

  9.培養基分裝設備

  小型組織培養實(shí)驗室可采用燒杯、漏斗等作為分裝培養基的工具。也可采用醫用“下口杯”作為分裝工具,在“下口杯”的下口管上套一段軟膠管,加一彈簧止水夾,使用時(shí)非常合用。更大規;蛞蟾蕰r(shí),可考慮采用液體自動(dòng)定量灌注設備。

  10.高壓滅菌鍋

  用以進(jìn)行培養基和器械用具的滅菌。小規模實(shí)驗室可選用小型手提式高壓滅菌鍋。如果是連續的大規模生產(chǎn),應選用大型立式的或臥式的高壓滅菌鍋。通常以電作能源。

  11.烘箱

  用于干燥洗凈的玻璃器皿,也可用于干熱滅菌和測定干物重。用于干燥需保持80~100℃;進(jìn)行干熱滅菌需保持150℃,達1~3小時(shí);若測定干物重,則溫度應控制在80℃烘干。

  12.恒溫培養箱

  內有溫度調節器,生化培養箱還配有光源,用于植物材料的培養。

 。ㄈ┙臃N室

  接種室是進(jìn)行植物材料的分離接種及培養物轉移的一個(gè)重要操作室。其無(wú)菌條件的好壞對組織培養成功與否起重要作用。

  在工作方便的前提下,無(wú)菌操作室宜小不宜大,一般7~8m2;要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光潔,易于清潔和消毒。無(wú)菌操作室應配置拉動(dòng)門(mén),以減少開(kāi)關(guān)門(mén)時(shí)的空氣擾動(dòng)。

  無(wú)菌操作室要求干爽安靜,清潔明亮,在適當位置吊裝1~2盞紫外線(xiàn)滅菌燈,用以經(jīng)常地照射滅菌。好能安置一小型空調,使室溫可控,這樣可讓門(mén)窗緊閉,減少與外界空氣對流。

  無(wú)菌操作室應設有緩沖間,面積2 m2為宜。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時(shí)帶入雜菌。緩沖間好也安一盞紫外滅菌燈,用以照射滅菌。

  無(wú)菌操作室的主要設備及用具有:

  1.接種箱

  在投資少的情況下,可以用接種箱來(lái)代替超凈臺。接種箱依靠密閉、藥劑熏蒸和紫外燈照射來(lái)保證內部空間無(wú)菌。但操作活動(dòng)受限制,準備時(shí)間長(cháng),工作效率低。

  2.超凈工作臺

  超凈臺的點(diǎn)是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,準備時(shí)間短。開(kāi)機10分鐘即可操作,可進(jìn)行長(cháng)時(shí)間使用。并可以保證無(wú)菌材料在轉移接種過(guò)程中不受污染。。

  3.無(wú)菌操作用的器具。

  按單人超凈臺上的用量計:酒精燈1個(gè);20~25cm長(cháng)的醫用鑷子1把;4號解剖刀1把,解剖刀片若干;15cm醫用剪1把;500ml廣口瓶1只,內放酒精,現代專(zhuān)業(yè)組培室多用接種器械滅菌器和容器口滅菌器,用于浸泡鑷子、刀、剪等;用于架放灼燒過(guò)的刀、鑷子的小架。

  4.擱架。

  貯放高壓滅菌后等待接種的培養基。

 。ㄋ模┡囵B室

  是將接種的材料進(jìn)行培養生長(cháng)的場(chǎng)所。培養室的大小可根據需要的培養架的大小、數目、及其它附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。高度比培養架略高為宜,周?chē)鷫Ρ谝笥薪^熱防火的性能。

  培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬制成,一般設5層,低一層離地高約10厘米,其它每層間隔30厘米左右,培養架即高1.8米左右。培養架長(cháng)度,因一般在每層上端裝置日光燈,以供照明,所以都是根據日光燈的長(cháng)度而設計,如采用28W日光燈,則長(cháng)1.25m,21 W的長(cháng)1米即可。寬度一般為50cm。

  培養室重要的因子是溫度,一般保持在20~27℃左右,可安裝窗式或立式空調機。要求溫度因熱帶植物和寒帶植物等的種類(lèi)不同而異,好不同種類(lèi)有不同的培養室。
組培室設備
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