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      600-2000平米組培室設計方案

        組培室建設首要考慮的問(wèn)題就是組培室需要哪些設備條件和需要什么樣的培養條件。對這些有了全面了解以后,我們便可以因地制宜地新建或利用現有房屋建設實(shí)驗室。在設計組培室時(shí),一般情況應按組培的流程來(lái)設計,同時(shí)考慮人物分流順暢,空間合理利用。植物組織培養要求嚴格的無(wú)菌的條件,需要一定專(zhuān)業(yè)儀器設備、器材和用具,同時(shí)還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。
        
        第一、實(shí)驗室
        
        一個(gè)標準的組織培養實(shí)驗室應當包括洗滌室、配置室、接種室、培養室、觀(guān)察室(冷卻室)、滅菌室、洗苗室等。在實(shí)際中可結合可行條件,合并一部分。
        
       。ㄒ唬┫礈焓
        
        洗滌室完成玻璃器皿和其它儀器的清洗、干燥和貯存。室內應配備大型水槽,用于培養器皿的洗滌,最好是內襯白瓷磚的水泥槽。為防止碰壞玻璃器皿,可鋪橡膠板,上下水道要暢通。備有大型塑料筐,用于放置培養器皿?芍苯又糜跀R架上,以節約空間和便于運輸工作。備有空干架,以空干涮凈的培養器皿。
        
       。ǘ┡渲檬、滅菌室(可分開(kāi))
        
        準備室要求明亮、通風(fēng)。在準備室內要完成培養基制備以及試管苗出瓶、清洗與整理工作。如果房間較多,可將準備室分為洗滌室和配置室兩部分。洗滌室專(zhuān)門(mén)負責試管苗出瓶與培養器皿的清洗工作;配置室則負責培養基的配制、分裝、包扎和高壓滅菌等工作。
        
        為完成培養基的制備工作,準備室還應配備以下儀器設備:
        
        1.工作臺。 其高度應方便配制工作。
        
        2.藥品柜。 用以放置常用藥品。
        
        3.普通冰箱。。主要用于貯存母液、各種易變質(zhì)、易分解的化學(xué)藥品以及植物材料等。
        
        4.電子分析天平和托盤(pán)天平。 電子分析天平精確度為0.001g,用于稱(chēng)取大量元素、微量元素、維生素、激素等微量藥品;托盤(pán)天平精確度為0.1g,用于稱(chēng)取用量較大的糖和瓊脂等。天平應放置在干燥、不受振動(dòng)的固定操作臺上。
        
        5.純水儀或電蒸餾水器。純水儀提供純水,水質(zhì)好。電蒸餾水器, 采用硬質(zhì)玻璃或金屬制成。蒸餾水用于配制母液或培養基,配培養基可用自來(lái)水來(lái)代替,若實(shí)驗要求嚴格的話(huà),則須用蒸餾水。
        
        6.磁力攪拌器  磁力攪拌器用于加速攪拌難溶的物質(zhì),如各種化學(xué)物質(zhì)、瓊脂粉等 。磁力攪拌器還可加熱,使之更利于溶解。
        
        7.恒溫水浴鍋或恒溫振蕩水浴。 水浴鍋用于難溶藥品的溶解、瓊脂的溶化等。若沒(méi)有水浴鍋,也可用1500或2000W電爐或電飯鍋代替。電爐應配有鋁鍋。
        
        8.酸度計 組織培養中培養基pH值的準確度是十分重要的,應當使用酸度計,若無(wú)酸度計,也可使用pH試紙進(jìn)行粗測。首次使用酸度計前,應用標準液調節定位,然后固定。 測量pH時(shí),待測液必須充分攪拌均勻。如果培養基溫度過(guò)高,測量時(shí)要調整pH計上的溫度扭使之和培養基溫度相當。注意保護好玻璃電極,用后電極應用蒸餾水沖洗凈,蓋上電極帽。
        
        9.培養基分裝設備。 小型組織培養實(shí)驗室可采用燒杯、漏斗等作為分裝培養基的工具。也可采用醫用“下口杯”作為分裝工具,在“下口杯”的下口管上套一段軟膠管,加一彈簧止水夾,使用時(shí)非常合用。更大規;蛞蟾蕰r(shí),可考慮采用液體自動(dòng)定量灌注設備。
        
        10.高壓滅菌鍋。 用以進(jìn)行培養基和器械用具的滅菌。小規模實(shí)驗室可選用小型手提式高壓滅菌鍋。如果是連續的大規模生產(chǎn),應選用大型立式的或臥式的高壓滅菌鍋。通常以電作能源。
        
        11.烘箱。 用于干燥洗凈的玻璃器皿,也可用于干熱滅菌和測定干物重。用于干燥需保持80~100℃;進(jìn)行干熱滅菌需保持150℃,達1~3小時(shí);若測定干物重,則溫度應控制在80℃烘干。
        
        12.恒溫培養箱 。內有溫度調節器,生化培養箱還配有光源,用于植物材料的培養。
        
       。ㄈ┙臃N室
        
        接種室是是進(jìn)行植物材料的分離接種及培養物轉移的一個(gè)重要操作室。其無(wú)菌條件的好壞對組織培養成功與否起重要作用。
        
        在工作方便的前提下,無(wú)菌操作室宜小不宜大,一般7~8m2;要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光潔,易于清潔和消毒。無(wú)菌操作室應配置拉動(dòng)門(mén),以減少開(kāi)關(guān)門(mén)時(shí)的空氣擾動(dòng)。
        
        無(wú)菌操作室要求干爽安靜,清潔明亮,在適當位置吊裝1~2盞紫外線(xiàn)滅菌燈,用以經(jīng)常地照射滅菌。最好能安置一小型空調,使室溫可控,這樣可讓門(mén)窗緊閉,減少與外界空氣對流。
        
        無(wú)菌操作室應設有緩沖間,面積2 m2為宜。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時(shí)帶入雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外滅菌燈,用以照射滅菌。。
        
        無(wú)菌操作室的主要設備及用具有:
        
        1.接種箱 在投資少的情況下,可以用接種箱來(lái)代替超凈臺。接種箱依靠密閉、藥劑熏蒸和紫外燈照射來(lái)保證內部空間無(wú)菌。但操作活動(dòng)受限制,準備時(shí)間長(cháng),工作效率低。
        
        2.超凈工作臺 超凈臺的優(yōu)點(diǎn)是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,準備時(shí)間短。開(kāi)機10分鐘即可操作,可進(jìn)行長(cháng)時(shí)間使用。并可以保證無(wú)菌材料在轉移接種過(guò)程中不受污染。。
        
        3.無(wú)菌操作用的器具。 按單人超凈臺上的用量計:酒精燈1個(gè);20~25cm長(cháng)的醫用鑷子1把;4號解剖刀1把,解剖刀片若干;15cm醫用剪1把;500ml廣口瓶1只,內放酒精,現代專(zhuān)業(yè)組培室多用接種器械滅菌器和容器口滅菌器,用于浸泡鑷子、刀、剪等;用于架放灼燒過(guò)的刀、鑷子的小架。
        
        4.擱架。 貯放高壓滅菌后等待接種的培養基。
        
       。ㄋ模┡囵B室
        
        是將接種的材料進(jìn)行培養生長(cháng)的場(chǎng)所。培養室的大小可根據需要的培養架的大小、數目、及其它附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。高度比培養架略高為宜,周?chē)鷫Ρ谝笥薪^熱防火的性能。
        
        培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬制成,一般設5層,最低一層離地高約100厘米,其它每層間隔30厘米左右,培養架即高1.7米左右。培養架長(cháng)度,因一般在每層上端裝置日光燈,以供照明,所以都是根據日光燈的長(cháng)度而設計,如采用40W日光燈,則長(cháng)1.3m,30 W的長(cháng)1米即可。寬度一般為60cm。
        
        培養室最重要的因子是溫度, 一般保持在20~27℃左右,可安裝窗式或立式空調機。要求溫度因熱帶植物和寒帶植物等的種類(lèi)不同而異,最好不同種類(lèi)有不同的培養室。
        
        室內濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70~80%為好,可安裝加濕器。
        
        培養架上裝置日光燈時(shí),可安裝定時(shí)開(kāi)關(guān)鐘控制照明時(shí)間,植物組織培養的光照強度一般在1000~4000勒克斯(lux),每天照明10~16小時(shí),也有的需要連續照明。短日照植物需要短日照條件,長(cháng)日照植物需要長(cháng)日照條件。
        
        現代組培實(shí)驗室大多設計為采用天然太陽(yáng)光照作為能源,這樣不但可以節省能源,而且組培苗接受太陽(yáng)光生長(cháng)良好,馴化易成活。在陰雨天用燈光作補充。
        
        補光光源目前專(zhuān)業(yè)的組培室用全光譜冷光燈或led組培專(zhuān)用燈。
        
        第二、 設備和器材
        
       。ㄒ唬┎A髅
        
        在組織培養中配制培養基和進(jìn)行培養需大量的玻璃器皿。 要求由堿性溶解度小的硬質(zhì)玻璃制成, 以保證長(cháng)期貯存藥品及培養的效果;培養用的還要求透光度好, 能耐高壓高溫,能方便放入培養基和培養材料的器皿,根據培養的目的和要求,可以采用不同種類(lèi)、規格的玻璃器皿.其中以試管、三角瓶、培養皿等使用較多。
        
        最常使用的是三角瓶,規格有100、250、500毫升等, 一般使用100毫升三角瓶,無(wú)論靜止或振蕩培養皆適用。其培養面積大,利于組織生長(cháng),受光也比試管好。由于瓶口較小,亦不易污染。
        
        培養皿常用9、12厘米直徑等規格,要求上、下能密切吻合。這在游離細胞、 原生質(zhì)體、花粉等的靜置培養、看護培養、無(wú)菌種子的發(fā)芽、植物材料的分離等都需采用。
        
        試管常用口徑18×180 mm或20×200mm規格?捎糜谂囵B較高的試管苗 ,另外也不易污染。
        
        培養器皿還可就地取材,采用一些代用品。工廠(chǎng)化生產(chǎn)可采用廣口的200ml罐頭瓶,加蓋半透明的塑料蓋,由于瓶口大,所以大量繁殖時(shí)操作方便、 工作效率高,也減少了培養材料的損傷。但缺點(diǎn)是易引起污染。
        
        目前,培養容器和制備培養基所需的玻璃器皿漸被塑料器皿所代替。塑料容器具有質(zhì)輕、透明、不易破碎、成本低等優(yōu)點(diǎn),如培養容器多為平底方盒形,可增加培養的植株數,并能一層層地疊摞起來(lái),從而節約空間。這類(lèi)塑料制品多是采用聚丙烯材料制成,能耐高溫,可進(jìn)行高壓滅菌。有些產(chǎn)品為一次性消耗品,不但可節省洗滌人工,還可節省時(shí)間,提率。一次性塑料容器或帶螺絲帽的玻璃瓶,無(wú)須另外配蓋,使用時(shí)是非常方便的。
        
        瓶口封塞可用多種方法,要具有一定的通氣性和密閉性,以防止培養基干燥和雜菌污染。以前封口常用棉塞。不過(guò)這種封口辦法夏季極易污染,且不易保持培養基濕度,F在多采用聚丙烯塑料膜作為封口,以線(xiàn)繩結扎或橡皮圈箍扎。為了增加通氣性,可在里面襯一層硫酸紙或牛皮紙。這樣經(jīng)濟方便,且通氣好。也可采用專(zhuān)用的封口材料如封口膜。
        
        在組織培養中配制培養基,貯藏母液,材料的消毒等需要各種化學(xué)實(shí)驗用的玻璃器皿,包括100、250、1000毫升燒杯;100、1000毫升量筒; 100、1000毫升試劑瓶(棕色)等等。
        
       。ǘ┢餍涤镁
        
       。保囎宇(lèi)
        
        主要采用醫療上用的鑷子。根據操作的需要有各種類(lèi)型,若用100毫升的三角瓶作為培養瓶, 可用20厘米長(cháng)的鑷子。鑷子過(guò)短.容易使手接觸瓶口, 造成污染。鑷子太長(cháng),使用起來(lái)不靈活。某些微小部分的精細操作則用鐘表鑷子, 如在分離莖尖幼葉時(shí),由于其尖端鋒利,所以幾乎可代替剪刀使用。
        
       。玻舻额(lèi)
        
        可采用五官科用的中型剪刀。主要用于切斷莖段、葉片等。也可以用彎形剪刀,由于其頭部彎曲,可以深入到瓶口中進(jìn)行剪切。
        
        3.解剖刀
        
        切割較小材料時(shí)可用解剖刀。 分離莖尖分生組織,有時(shí)也用解剖刀。常用的解剖刀刀片可以經(jīng)常調換,刀口要保持鋒利狀態(tài),否則切割時(shí)會(huì )造成擠壓,引起周?chē)毎M織大量死亡,影響培養效果。
        
       。矗馄梳
        
        解剖針用于深入到培養瓶中, 轉移細胞或愈傷組織。也可用于分離微莖尖的幼葉。
      組培室設備
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